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lncRNA与microRNA的靶点验证
lncRNA的作用机制有很多，以ceRNA（competing endogenous RNA，竞争性的内源RNA）形式发挥功能是其中的一种，即lncRNA与靶基因的3’UTR竞争结合相同的microRNA，降低microRNA对靶基因的抑制功能，从而上调靶基因的表达量。为了检测其效果，我们可以用Western Blot检测靶蛋白的表达水平，也可以用qRT-PCR检测靶基因的表达。但是这两种方式都无法确定lncRNA是否通过ceRNA方式调控靶基因的表达。因此，我们可以通过“microRNA与lncRNA结合验证”，“microRNA与靶基因结合验证”和“lncRNA与靶基因3’UTR竞争结合microRNA验证”实验，构建Sensor reporter并进行活性检测，对lncRNA，microRNA与靶基因这三者间的作用机制作出准确判断。
服务优势：
（1）利用专业软件进行miRNA与lncRNA和靶基因3’UTR区的结合位点预测；
（2）采用Promega公司特有psiCHECK质粒；
（3）所采用的Luciferase双荧光报告系统，可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度；
（4）采用瞬时转染技术，操作简便、快速，周期短，适用于绝大多数细胞类型。
服务流程：
一、microRNA与lncRNA结合验证
（1）直接合成靶lncRNA序列或microRNA在靶lncRNA上的结合位点序列；
（2）将上述合成的DNA片段克隆至报告基因载体psiCHECK质粒；
（3）购买microRNA mimics；
（4）将报告载体与microRNA mimics共转染293T细胞；
（5）多功能酶标仪检测报告基因的表达水平；
（6）数据分析，整理提交客户原始数据及项目报告；
注：为了实验的严谨性，可加入靶lncRNA序列中microRNA预测结合区域的突变体作为对照，进一步说明问题。
二、microRNA与靶基因结合验证
（1）直接合成靶基因3’UTR序列或microRNA在靶基因3’UTR上的结合位点序列；
（2）将上述合成的DNA片段克隆至报告基因载体psiCHECK质粒；
（3）购买microRNA mimics；
（4）将报告载体与microRNA mimics共转染293T细胞；
（5）多功能酶标仪检测报告基因的表达水平；
（6）数据分析，整理提交客户原始数据及项目报告；
注：为了实验的严谨性，可加入靶基因3’UTR区microRNA预测结合区域的突变体作为对照，进一步说明问题。
三、lncRNA与靶基因3’UTR竞争结合microRNA验证
（1）直接合成靶基因3’UTR序列或microRNA在靶基因3’UTR上的结合位点序列；
（2）将上述合成的DNA片段克隆至报告基因载体psiCHECK质粒；
（3）直接合成lncRNA序列，构建lncRNA过表达质粒；
（4）将报告载体与lncRNA表达载体共转染293T细胞；
（5）多功能酶标仪检测报告基因的表达水平；
（6）数据分析，整理提交客户原始数据及项目报告；
注：为了实验的严谨性，可加入靶基因3’UTR区microRNA预测结合区域的突变型报告载体及lncRNA序列中microRNA预测结合区域的突变型表达载体作为对照，进一步说明问题。
lncRNA与microRNA的靶点验证
lncRNA的作用机制有很多，以ceRNA（competing endogenous RNA，竞争性的内源RNA）形式发挥功能是其中的一种，即lncRNA与靶基因的3’UTR竞争结合相同的microRNA，降低microRNA对靶基因的抑制功能，从而上调靶基因的表达量。为了检测其效果，我们可以用Western Blot检测靶蛋白的表达水平，也可以用qRT-PCR检测靶基因的表达。但是这两种方式都无法确定lncRNA是否通过ceRNA方式调控靶基因的表达。因此，我们可以通过“microRNA与lncRNA结合验证”，“microRNA与靶基因结合验证”和“lncRNA与靶基因3’UTR竞争结合microRNA验证”实验，构建Sensor reporter并进行活性检测，对lncRNA，microRNA与靶基因这三者间的作用机制作出准确判断。
服务优势：
（1）利用专业软件进行miRNA与lncRNA和靶基因3’UTR区的结合位点预测；
（2）采用Promega公司特有psiCHECK质粒；
（3）所采用的Luciferase双荧光报告系统，可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度；
（4）采用瞬时转染技术，操作简便、快速，周期短，适用于绝大多数细胞类型。
服务流程：
一、microRNA与lncRNA结合验证
（1）直接合成靶lncRNA序列或microRNA在靶lncRNA上的结合位点序列；
（2）将上述合成的DNA片段克隆至报告基因载体psiCHECK质粒；
（3）购买microRNA mimics；
（4）将报告载体与microRNA mimics共转染293T细胞；
（5）多功能酶标仪检测报告基因的表达水平；
（6）数据分析，整理提交客户原始数据及项目报告；
注：为了实验的严谨性，可加入靶lncRNA序列中microRNA预测结合区域的突变体作为对照，进一步说明问题。
二、microRNA与靶基因结合验证
（1）直接合成靶基因3’UTR序列或microRNA在靶基因3’UTR上的结合位点序列；
（2）将上述合成的DNA片段克隆至报告基因载体psiCHECK质粒；
（3）购买microRNA mimics；
（4）将报告载体与microRNA mimics共转染293T细胞；
（5）多功能酶标仪检测报告基因的表达水平；
（6）数据分析，整理提交客户原始数据及项目报告；
注：为了实验的严谨性，可加入靶基因3’UTR区microRNA预测结合区域的突变体作为对照，进一步说明问题。
三、lncRNA与靶基因3’UTR竞争结合microRNA验证
（1）直接合成靶基因3’UTR序列或microRNA在靶基因3’UTR上的结合位点序列；
（2）将上述合成的DNA片段克隆至报告基因载体psiCHECK质粒；
（3）直接合成lncRNA序列，构建lncRNA过表达质粒；
（4）将报告载体与lncRNA表达载体共转染293T细胞；
（5）多功能酶标仪检测报告基因的表达水平；
（6）数据分析，整理提交客户原始数据及项目报告；
注：为了实验的严谨性，可加入靶基因3’UTR区microRNA预测结合区域的突变型报告载体及lncRNA序列中microRNA预测结合区域的突变型表达载体作为对照，进一步说明问题。
单位介绍
- 汉恒生物科技（上海）有限公司是国内首家专业从事腺相关病毒（AAV）载体研究和开发的公司，成立于2010年。拥有一支由博士和硕士为主50多人的优秀研发团队，拥有全面的AAV血清型体系，完善的AAV光遗传原件库，快速表达的scAAV体系和AAV衍生的在体应用工具，开发了自噬流研究工具、分子载体探针、Crispr基因编辑等基因及信号通路研究工具，积累了上千个病毒项目经验，是国内唯一一家拥有AAV-saCas9在体编辑工具和AAV-LC3在体自噬流检测工具的公司。公司建立了ISO9001质量管理体系，拥有发明专利1项，申请发明专利5项。
单位资质
暂无信息
| 买家 | 服务规格 | 订购时间 |
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汉恒生物科技（上海）有限公司
机构介绍: 汉恒生物科技（上海）有限公司是国内首家专业从事腺相关病毒（AAV）载体研究和开发的公司，成立于2010年。拥有一支由博士和硕士为主50多人的优秀研发团队，拥有全面的AAV血清型体系，完善的AAV光遗传原件库，快速表达的scAAV体系和AAV衍生的在体应用工具，开发了自噬流研究工具、分子载体探针、Crispr基因编辑等基因及信号通路研究工具，积累了上千个病毒项目经验，是国内唯一一家拥有AAV-saCas9在体编辑工具和AAV-LC3在体自噬流检测工具的公司。公司建立了ISO9001质量管理体系，拥有发明专利1项，申请发明专利5项。
资质能力：
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